艰难梭菌二元毒素A链适配体的筛选和鉴定

摘要：

目的 筛选和鉴定艰难梭菌(CD)二元毒素A链适配体(Apt).方法 利用指数富集配体系统进化(SELEX)技术筛选CDTa适配体,并使用非竞争ELISA法测定其亲和常数(KA).结果 成功构建了pET-28b-CDTa原核表达载体,并诱导表达出CDTa蛋白.经过11轮筛选,文库中随机ssDNA与二元毒素A链的结合率从3.2％增加到42.3％,筛选出来39条适配体,二级结构最稳定的是Apt-A53,其亲和常数为3.75×10-6.结论 利用SELEX技术可成功筛选出高亲和力的艰难梭菌二元毒素A链适配体,为临床上高毒力艰难梭菌感染的实验室快速诊断提供一定的参考工具.

关键词：艰难梭菌二元毒素A链;SELEX;适配体;亲和常数

所属期刊栏目：21

分类号：R446.5(诊断学)

资助基金：广州市科技计划项目201510010241

在线出版日期：2022-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1396-1399