弓形虫pcDNA3.1(+)-Flag-ROP18质粒构建及对RAW264.7细胞凋亡影响研究

摘要：

目的 构建pcDNA3.1(+)-Flag-ROP18真核表达载体,体外研究弓形虫ROP18蛋白是否具有抑制H2O2诱导RAW264.7细胞凋亡的作用.方法 通过PCR扩增ROP18基因,构建pcDNA3.1(+)-Flag-ROP18真核表达载体,转染RAW264.7细胞,为重组质粒组;并设置未含POP18基因的空白质粒为对照组.分别检测重组质粒组与对照组线粒体及细胞质中细胞色素c含量.结果 成功构建pcDNA3.1(+)-Flag-ROP 18重组质粒,通过双酶切鉴定,得到2个符合预期大小的条带.使用H2O2分别诱导重组质粒组与对照组对RAW264.7细胞的凋亡作用,分别检测线粒体及细胞质中细胞色素c含量,发现两组细胞色素c含量水平无区别.结论 ROP18没有抑制H2O2经线粒体途径诱导RAW264.7细胞凋亡,为进一步探索ROP18蛋白功能及弓形虫病的发病机制提供了理论依据.

关键词：弓形虫;ROP18蛋白;凋亡

所属期刊栏目：21

分类号：R382.5(医学寄生虫学)

资助基金：湖南省教育厅科学研究项目17C1419

在线出版日期：2021-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1125-1128,封3