乙型肝炎病毒B、C、D基因型AAV-HBV小鼠模型构建与病毒学特征比较

摘要：

目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)B、C基因型中国流行株腺相关病毒介导的乙肝病毒(AAV-HBV)小鼠模型,并研究其病毒学变化特征.方法 以B、C基因型HBV流行株序列为基础,并参照常用D基因型病毒序列,分别构建出携带1.3×基因组的腺相关病毒载体质粒:pAAV-HBV1.3× (B)、pAAV-HBV1.3× (C)和pAAV-HBV1.3× (D).通过三质粒共转染方法在293细胞中包装成三种成熟的腺相关病毒载体rAAV-HBV 1.3(B)、rAAV-HBV 1.3(C)与rAAV-HBV 1.3(D).C57BL/J小鼠通过尾静脉注射相同剂量的AAV-HBV病毒载体,在注射后不同时间点,用ELISA方法检测血清中HBsAg和HBeAg表达水平,用荧光定量PCR(Q-PCR)方法检测小鼠血清中HBV DNA拷贝数.结果 新构建B、C基因型两株病毒有更高HBsAg表达水平,B基因型小鼠血清中HBsAg检测值(均值)波动在957.67～2 590.04 IU/mL,C基因型小鼠血清HBsAg波动在725.21～3 195.16 IU/mL,D基因型小鼠血清HBsAg波动在153.4～531.8 IU/mL.B基因型小鼠血清中,HBsAg与HBV DNA比值最高,D基因型最低.新构建B、C基因型两株病毒表现出与常用D基因型病毒不同的血清动力学特征.B、C基因型小鼠的HBsAg和HBV DNA可在1周内快速达到较高水平,并维持稳定,在第3～4周表现出波动下降,随后表达水平回升.D基因型小鼠HBsAg在10d内达到峰值,然后不断降低,HBV DNA在第3～4周也有明显波动.B、C、D三种基因型HBeAg在第1周较低,在两周达到峰值,并保持稳定.结论 基于我国流行B、C基因型序列,成功建立了两株AAV-HBV小鼠模型,为研究B、C基因型病毒提供了新工具.

关键词：乙型肝炎病毒、AAV-HBV、B、C基因型

所属期刊栏目：20

分类号：R512.62(传染病)

资助基金：国家自然科学基金;十三五国家科技重大专项

在线出版日期：2020-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：297-302,308