改良DNA提取法对皮肤结核PCR检出率的影响

摘要：

目的 探索适用于石蜡包埋皮肤组织的DNA提取方法,提高结核分支杆菌PCR检出率.方法 选择明确诊断的结核性肉芽肿或怀疑结核性肉芽肿的皮肤病理标本46例,分别以二甲苯脱蜡-试剂盒法和TES脱蜡-改良试剂盒法提取总DNA,荧光PCR扩增后分析结核分支杆菌的阳性检出率,并与抗酸染色的结果进行比较.结果 TES脱蜡-改良试剂盒法提取的总DNA浓度显著高于二甲苯脱蜡-试剂盒法(P<0.05),并且提取的DNA质量更好.TES脱蜡-改良试剂盒法所提DNA的PCR总体阳性率显著高于二甲苯脱蜡-试剂盒法(P<0.05).改进后的DNA提取方法荧光PCR的阳性检出率较抗酸染色高(P<0.05).抗酸染色阳性的标本与PCR检测结果有较好的一致性(Kappa=0.804),但抗酸染色阴性的标本与PCR检测结果的一致性较差(Kappa=0.257).结论 TES脱蜡-改良试剂盒法提取石蜡包埋皮肤组织的总DNA提取率和提取质量高于二甲苯脱蜡-试剂盒法,显著提高了结核分支杆菌的PCR阳性检出率.

关键词：石蜡包埋皮肤组织、DNA提取、结核分支杆菌、荧光PCR

所属期刊栏目：19

分类号：R529.4(结核病)

资助基金：贵州省科学技术基金项目黔科合基础[2018]1103;贵州省人民医院博士基金GZSYBS[2017]03

在线出版日期：2019-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：704-706,710