华支睾吸虫溶血磷脂酶对肝星状细胞体外作用的研究

摘要：

目的 探讨华支睾吸虫溶血磷脂酶(CsLysoPLA)对肝星状细胞的作用.方法 实验分为4组:PBS对照组为PBS孵育肝星状细胞系LX?2细胞24 h;CsLysoPLA单独刺激组为CsLysoPLA(10μg/mL)单独孵育LX?2细胞24 h;联合刺激组为不同浓度CsLysoPLA(1、5、10μg/mL)孵育LX?2细胞2 h后,IL?13(20 ng/mL)孵育24 h;IL?13单独刺激组为IL?13(20 ng/mL)单独孵育LX?2细胞24 h;逆转录荧光定量PCR(qRT?PCR)检测星状细胞活化指标分子α?平滑肌肌动蛋白(α?SMA)以及纤维化相关分子胶原蛋白Ⅰ型(Collagen?Ⅰ)、胶原蛋白Ⅲ型(Collagen?Ⅲ)以及促纤维化分子转化生长因子β1(TGF?β1)、血小板源性生长因子(PDGF)的mRNA水平.Western Blotting检测不同浓度CsLysoPLA(1、5、10μg/mL)联合IL?13(20 ng/mL)刺激时LX?2细胞α?SMA蛋白表达量.结果 CsLysoPLA(10μg/mL)可直接抑制LX?2细胞α?SMA、Collagen?Ⅲ的转录,与PBS对照组相比差异有统计学意义(P=0.0142、0.0027);并且CsLysoPLA(10μg/mL)可刺激LX?2细胞TGF?β1、PDGF基因转录升高,与PBS对照组相比差异有统计学意义(P=0.0091、0.0034);CsLysoPLA(10μg/mL)可以下调IL?13引起的α?SMA、Collagen?Ⅰ、Collagen?Ⅲ、TGF?β1的mRNA水平的升高,与单独IL?13刺激组相比差异有统计学意义(P=0.0030、0.0119、0.0430、0.0256);Western Bloting结果显示,不同浓度CsLysoPLA(1、5、10μg/mL)均可以下调IL?13引起的星状细胞活化分子α?SMA的表达,与单独IL?13刺激组相比差异有统计学意义(P=0.0080、0.0005、0.0002).结论 CsLysoPLA(10μg/mL)在高浓度下既可以直接抑制LX?2细胞纤维化,又可以抑制IL?13引起的LX?2细胞纤维化,可能在华支睾吸虫严重感染所致纤维化过程中发挥了抑制纤维化的作用.

关键词：华支睾吸虫、溶血磷脂酶、白细胞介素?13、肝纤维化

所属期刊栏目：19

分类号：R383.22(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金81772212

在线出版日期：2019-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：674-677,694