华支睾吸虫合并HBV感染对肝星状细胞和巨噬细胞作用的体外研究

摘要：

目的 华支睾吸虫合并HBV感染对肝星状细胞和巨噬细胞的作用.方法 以华支睾吸虫分泌排泄蛋白(CsESP)(10μg/mL)合并HepG2.2.15细胞(5×105个)共孵育人肝星状细胞(LX-2),同时设10μg/mL CsESP、5×105个HepG2.2.15单独处理组和PBS组.荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组肝纤维化相关指标α-平滑肌蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ的转录水平;利用CsESP(10μg/mL)合并乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)(5μg/mL)共同刺激巨噬细胞RAW264.7细胞,同时设10μg/mL CsESP、5μg/mL HBeAg单独处理组和PBS组,qRT-PCR法检测各组一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、NLRP3炎症小体、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达情况,同时使用流式细胞术检测其凋亡水平变化.结果 qRT-PCR法检测结果显示,CsESP合并HepG2.2.15处理组中LX-2细胞α-SMA和Collagen-Ⅰ的m RNA水平与CsESP或HepG2.2.15单独处理组相比显著上升,差异有统计学意义(P＜0.05),而Collagen-Ⅲ表达变化不明显.CsESP与HBeAg共处理诱导RAW264.7细胞中NLRP3、IL-1β、IL-6、TGF-β、TNF-α和iNOS的mRNA水平与CsESP或HBeAg单独刺激组相比显著上升,差异有统计学意义(P＜0.05).CsESP与HBeAg共处理组凋亡细胞比率为16.35％,明显高于CsESP、HBeAg单独处理组的6.03％和12.52％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 华支睾吸虫合并HBV感染体外可促进肝星状细胞的激活,并可促进巨噬细胞炎症因子的释放及细胞凋亡,可能促进肝脏炎症、肝纤维化的进展.

关键词：华支睾吸虫、乙型肝炎、肝纤维化、巨噬细胞

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分类号：R383.22(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金81772212;广东省自然科学基金2018A0303130025;广东省自然科学基金博士科研启动项目2018A030310277;高校基本科研业务费广东省自然科学基金博士科研启动项目18zxxt10

在线出版日期：2019-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：387-392