SILAC技术研究DNP对鼻咽癌细胞株6-10B蛋白质组的影响

摘要：

目的 应用细胞培养稳定同位素标记技术(SILAC)结合生物质谱分析的方法,分析二亚硝基哌嗪(DNP)对6-10B细胞蛋白质表达的影响,并鉴定与转移相关的蛋白质.方法 利用SILAC标记6-10B细胞,得到“重标”的6-10B细胞,经DNP处理24 h后提取细胞总蛋白,与未经DNP处理的“轻标”细胞中提取的总蛋白等量混合,酶解肽段,经正交反相色谱分离后用质谱鉴定,对数据进行定性和定量分析.结果 共鉴定到2 853个蛋白质,其中172个表达上调,199个表达下调.筛选其中5个与肿瘤转移相关的蛋白质,进行Western blotting验证,证明SILAC定量结果的正确性.通过GO进行分析,从生物过程、细胞定位和分子功能3个方面对差异蛋白进行注释.结论 建立了利用SILAC技术研究宿主细胞-化学药物相互作用的方法,发现了DNP处理细胞的关键蛋白质,为探索DNP致鼻咽癌转移的分子机理提供了实验基础.

关键词：鼻咽癌、二亚硝基哌嗪、定量蛋白质组学

所属期刊栏目：17

分类号：R739.63(肿瘤学)

在线出版日期：2017-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：20-25