抗弓形虫腺苷激酶IgY的制备及理化性质的研究

摘要：

目的 制备抗重组刚地弓形虫腺苷激酶(AK)的抗体IgY,对IgY进行特异性鉴定,并用间接ELISA的方法进行滴度、耐热、耐酸、耐碱、耐胃蛋白酶等理化性质的研究.方法 利用弓形虫AK蛋白,免疫产蛋母鸡,制备并纯化抗AK的卵黄抗体IgY,SDS-PAGE和Westem blot进行特异性分析,间接EILSA进行滴度和理化性质的检测.结果 SDS-PAGE检测Igy分子量与理论值一致;Western blot显示制备的IgY为抗AK的特异性IgY;二喹啉甲酸(BCA)法测浓度为4.25 mg/ml;间接ELISA检测滴度为1∶1×105;耐热,温度80℃时作用5 min不降解;耐碱,pH为8.5时,作用120 min不降解;30％岩藻糖可以完全抑制在pH等于3时的迅速降解;37℃胃蛋白酶作用120 min不降解.结论 本研究成功制备并鉴定了抗AK的IgY,IgY具有滴度和浓度高、耐热、耐酸、耐碱、耐胃蛋白酶的性质,为下一步的研究提供了理论依据.

关键词：弓形虫、腺苷激酶、卵黄抗体、IgY

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分类号：R382(医学寄生虫学)

资助基金：国家重大基础研究计划2010CB530001;安徽医科大学校科研基金xkj2015056;合肥市第三人民医院院内课题2013013

在线出版日期：2016-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：958-961