害嗜鳞螨过敏原Lep d2的原核表达与纯化
目的 构建害嗜鳞螨(Lepidoglyphus destructor)过敏原Lepd2的原核表达系统,获得Lepd 2的重组纯化蛋白.方法 通过双酶切pUC-Lep 2质粒,获取基因Lepd2,并结合高保真PCR获取去信号肽基因rLep d 2,连接载体pET44a并转入表达菌株Rosetta;利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)和蛋白免疫印迹法分别进行诱导表达与鉴定;用盐酸胍溶解包涵体并进行透析复性;使用Strep Ⅱ亲和填料来纯化目的蛋白.结果 构建了Rosetta-rLep d 2的原核表达体系;rLep d 2蛋白在菌体内主要表达形式为包涵体,通过透析复性和亲和纯化获得了高纯度的rLepd2蛋白.结论 获得的重组rLep d 2蛋白可为下一步评价其过敏原性提供研究材料.
Lep d 2、害嗜鳞螨、原核表达、蛋白纯化
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R392.11
国家科技重大专项重点课题2014ZX0801105B;国家临床重点专科建设项目520102-110;广东省产学研项目2013B090500129
2016-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
691-694,698
