人3型腺病毒纤突的原核表达及其免疫原性分析

摘要：

目的：克隆表达人3型腺病毒（HAdV-3）的纤毛蛋白纤突片段（knob），分析其免疫原性，为腺病毒临床诊断试剂及新型疫苗的研发奠定基础。方法 PCR扩增knob基因片段，克隆到表达载体pGEX-4T-3中进行诱导表达，SDS-PAGE电泳分析表达产物，包涵体溶解复性后亲和层析纯化融合蛋白，Western blot鉴定，纯化的蛋白免疫小鼠制备抗血清，间接ELISA法检测小鼠血清的效价，Western blot鉴定抗血清特异性。结果成功构建了重组原核表达质粒pGEX-Ad3 knob，其在大肠杆菌中高效表达并纯化重组knob融合蛋白，融合蛋白免疫小鼠抗血清效价高达107， Western Blot证实此抗血清可识别人3型腺病毒纤维蛋白。结论成功获得了重组HAdV-3 knob蛋白，其具有强免疫原性，可以作为研发人3型腺病毒入侵机制研究、诊断试剂及疫苗研发的原料。

关键词：人3型腺病毒、纤毛蛋白、纤突、重组表达、多克隆抗体

分类号：R511.8(传染病)

资助基金：国家自然科学基金青年科学基金31200132；广东省自然科学基金S2013040015594；广东高校优秀青年创新人才培养计划项目育苗工程2013LYM0072

在线出版日期：2016-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：22-24,30