自身失活型慢病毒载体感染脐带血CD34+细胞的方法及效率
目的:研究自身失活型(SIN)慢病毒载体感染脐带血造血干细胞的方法及效率。方法利用钙转的方法实现携带有绿色荧光蛋白(GFP)的SIN慢病毒载体的包装,将浓缩后的病毒按照一定的感染复数(约为175)感染人脐带血CD34+细胞24 h,换正常培养基继续培养2 d后,利用流式细胞学方法检测CD34+%及CD34+GFP+%,并对感染SIN慢病毒载体的CD34+细胞进行集落形成能力检测。结果 SIN慢病毒载体感染CD34+细胞24 h后,换正常培养基继续培养2 d,检测细胞CD34+%可维持在97.80%,且感染效率可达34.20%;对比正常的脐带血CD34+细胞及经SIN慢病毒载体感染后的CD34+细胞,二者的集落形成能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过上述方法,在不影响脐带血CD34+细胞体外分化能力的前提下,实现了SIN慢病毒载体对CD34+细胞的有效感染。
自身失活型慢病毒载体、人脐带血、CD34+细胞
R322.2;Q813(人体形态学)
国家自然科学基金81350027
2016-04-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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