重组大肠杆菌表达的Ber e1纯化工艺中去除内毒素效果研究

摘要：

目的 去除重组巴西坚果过敏原蛋白Ber e 1(rBer e 1)溶液中的内毒素,为后续实验和重组过敏原蛋白的临床应用打下基础.方法 采用亲和层析法、超滤法和离子交换法联合应用以及Triton X-114萃取法与亲和层析法联合应用,比较这两个方案去除重组蛋白溶液中的内毒素效果.结果 亲和层析法、超滤法和离子交换法联合应用的内毒素去除率为99.99％,内毒素浓度为6.25 EU/ml,蛋白回收率为42.8％;Triton X-114萃取法与亲和层析法联合应用的内毒素去除率为99.99％,内毒素浓度为2.09 EU/ml,蛋白回收率为26.1％.结论 Triton X-114萃取法与亲和层析法联合应用蛋白溶液内毒素的去除效果较佳,且内毒素含量以及Triton X-114残留量均在《中国药典》的规定范围内.

关键词：内毒素、巴西坚果2S清蛋白、Triton X-l14萃取、亲和层析、超滤、离子交换层析

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分类号：Q51(蛋白质)

资助基金：国家科技重大专项重点课题2014ZX08011-005B;国家临床重点专科建设项目520102;广州市科技攻关项目201300000159

在线出版日期：2015-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：583-586