NF-κB介导大鼠肾小球系膜细胞Visfatin对促纤维化因子和细胞外基质表达的影响
目的 观察大鼠肾小球系膜细胞中内脏脂肪素(Visfatin)对促纤维化因子和细胞外基质(ECM)表达的影响并探讨核因子-κB(NF-κB)在此过程中的作用.方法 分别构建Visfatin表达质粒及Visfatin RNAi质粒,将细胞分为八组:A组:正常糖对照组;B组:正常糖+ NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC)组;C组:过表达Visfatin组;D组:过表达Visfatin +PDTC组;E组:空白表达载体组;F组:空白表达载体+PDTC组;G组:VisfatinRNAi组;H组:空白沉默载体组.比较过表达或沉默Visfatin前后促纤维因子及细胞外基质基因及蛋白表达的变化.用Realtime-PCR方法检测转录生长因子β(TGF-β)、结缔组织生长因子(CTGF)、纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂(PAI-1)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Ⅳ胶原(Col Ⅳ)等基因表达的变化,用Western Blot检测Visfatin、CTGF、FN等蛋白的表达,用电泳迁移率变动分析法(EMSA)检测NF-κB活性;以及通过观察PDTC处理对照组、过表达Visfatin组、空白表达载体组前后上述指标的变化.结果 大鼠肾系膜细胞过表达Visfatin后,NF-κB活性、Visfatin、TGF-β、CTGF、PAI-1、FN、Col Ⅰ、Col Ⅳ的mRNA表达量及Visfatin、CTGF、FN蛋白表达量显著升高(P＜0.05).下调Visfatin表达后,NF-κB活性、Visfatin、TGF-β、CTGF、PAI-1、FN、Col Ⅰ、Col Ⅳ的mRNA表达量及Visfatin、CTGF、FN蛋白表达量均显著降低(P＜0.05).PDTC处理的各组,NF-κB活性、TGF-β、CTGF、PAI-1、FN、ColⅠ、Col Ⅳ表达量与对应的未经PDTC处理组相比显著降低(P＜0.05).结论 在大鼠肾小球系膜细胞中,Visfatin可通过NF-κB通路诱导促纤维化因子和细胞外基质的表达.
Visfatin、NF-κB、促纤维化因子、细胞外基质
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R392.11
广州市科技计划项目2011J4100114
2015-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1399-1403
