人附睾蛋白4单克隆抗体的制备和鉴定

摘要：

目的 建立人附睾蛋白4(HE4)杂交瘤细胞株,并对其分泌的HE4单克隆抗体进行鉴定和初步应用,为HE4的功能研究和人源化抗体的制备奠定基础.方法 使用pcDNA3.0-HE4重组质粒免疫BALB/C小鼠,采用PEG融合技术建立杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体.通过免疫荧光法、有限稀释法及金标斑点法测定单克隆抗体的交叉反应性及免疫球蛋白的类型和亚类.结果 获得2株可稳定分泌HE4单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1C5和1C8,均为IgMK类.2株单抗能够与表达HE4蛋白的卵巢癌细胞发生反应,而不与Sp2/0细胞、CHO细胞等发生交叉反应.杂交瘤细胞株1C5培养上清效价为1∶160,腹水效价为1∶1 280,而杂交瘤细胞株1C8培养上清效价为1∶128,腹水效价为1∶1 024.结论 成功地制备出两株抗HE4单克隆抗体,均具有良好的特异性,为进一步建立免疫分析方法,进行HE4相关研究奠定了良好的基础.

关键词：卵巢癌、人附睾蛋白4、DNA免疫、单克隆抗体

所属期刊栏目：14

分类号：R737.31(肿瘤学)

资助基金：广东省人口和计划生育委员会科研项目20133093

在线出版日期：2014-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1030-1032,1040,封2