联合应用抗原递呈分子HSP70C基因的汉滩病毒嵌合基因GnS0.7、 GcS0.7重组腺病毒的构建及鉴定
目的 构建含有抗原加工递呈分子基因HSP70C的HTNV嵌合基因GnS0.7、GcS0.7重组腺病毒.方法 通过PCR扩增获得HSP70C基因,分别克隆入本室已构建的重组腺病毒转移载体pShuttle-pCAG-GnS0.7及pShuttle-pCAG-GcS0.7中,进而构建新的重组腺病毒转移载体pShuttle-pCAG-GnS0.7-HSP70C及pShuttle-pCAG-GcS0.7-HSP70C.进一步通过双酶切将转移载体中的目的嵌合基因再分别克隆入腺病毒载体,得到重组腺病毒载体rAd-pCAG-GnS0.7-HSP70C、rAd-pCAG-GcS0.7-HSP70C,使用PacⅠ线性化后转染HEK293细胞,包装后获得重组腺病毒,感染HEK293细胞后用免疫荧光法检测表达产物.结果 经过酶切、PCR扩增和测序结果显示,各重组腺病毒转移载体及重组腺病毒载体构建正确.免疫荧光实验检测到各重组腺病毒中目的蛋白的表达.结论 成功制备了含抗原递呈分子HSP70C基因的汉滩病毒嵌合基因GnS0.7、GcS0.7重组腺病毒,为进一步研究构建的汉滩病毒重组腺病毒的免疫学特性奠定了实验基础.
汉滩病毒、腺病毒、热休克蛋白70
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R373.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家自然科学基金31070810、81001344;西安市产业技术创新计划—技术转移促进工程CX12186-4
2014-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1005-1008,封4
