布氏锥虫未知CCCH-型锌指蛋白TbZC3H8功能特性的初步分析

摘要：

目的 通过RNAi和蛋白复合物鉴定来初步分析布氏锥虫未知锌指蛋白TbZC3H8的特性及功能.方法 运用蛋白数据库和分析软件对TbZC3H8进行序列分析和结构域预测；构建RNAi诱导表达细胞株分析TbZC3H8经RNAi敲低后对锥虫生长的影响,并通过RT-QPCR和Western blot检测RNAi干扰效率；构建异位融合表达myc-TAP标签的TbZC3H8细胞株,采用串联亲和纯化合并质谱鉴定其蛋白复合物组成；采用免疫荧光分析蛋白定位.结果 TbZC3H8的CCCH结构域在动基体原虫中高度保守；RNAi下调TbZC3H8后明显抑制了锥虫复制；TbZC3H8蛋白复合物中包含多种未知蛋白和两种RNA结合蛋白；TbZC3H8蛋白定位于胞质中,血清饥饿和热刺激对其定位无影响.结论 TbZC3H8是锥虫生长必需的,TbC3H8与RNA结合蛋白的相互作用暗示其可能在RNA加工代谢中发挥着作用.

关键词：布氏锥虫、CCCH型锌指蛋白、RNAi、串联亲和纯化

所属期刊栏目：13

分类号：R382.23(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金81171601

在线出版日期：2013-08-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：677-680,684