稳定过表达miR-26a肝癌细胞株的建立
目的 建立稳定过表达miR-26a的肝癌细胞株.方法 以CTE049质粒为模板,PCR扩增miR-26a序列418bp,片段两侧添加Xba Ⅰ和BamH Ⅰ酶切位点,In-Fusion克隆至pHAGE-fullEF1 a-MCS-IZsGreen中,次日挑选单菌落,提取质粒并进行测序和酶切鉴定；所构建的载体命名为pLVT-miR26a.获得pLVT-miR26a后,按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒包装和确认慢病毒是否成功生产；携带miR-26a和ZsGreen基因的慢病毒感染小鼠肝癌细胞(Hep1-6)、人肝癌细胞(BEL-7402、HepG2、Sk-Hep-1、HepG2-luc),以建立稳定过表达miR-26a的肝癌细胞系；qRT-PCR检测所建立肝癌细胞系中miR26a的表达水平.结果 测序和酶切证实成功构建了pLVT-miR26a,按标准程序生产的携带miR-26a和ZsGreen基因的慢病毒上清成功感染小鼠及人肝癌细胞.结论 成功建立稳定过表达miR-26a的肝癌细胞株,为相关后续研究打下了良好基础.
miR-26a、ZsGreen、慢病毒载体、肝癌
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R735.7(肿瘤学)
国家自然科学基金30271177;广东省自然科学基金9151063101000015;广东省科技计划项目2009B060300008;广州地区科学仪器协作共用网专用基金2006176
2013-05-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
140-142,204,封4
