抗伏马菌素B1单克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

目的 建立抗伏马菌素B1(FB1)的单克隆杂交瘤细胞株,制备抗FB1的单克隆抗体(McAb).方法 采用FB1-KLH偶联物小剂量长周期免疫BALB/c小鼠后,采用细胞融合方法获得分泌抗FB1的杂交瘤细胞株,采用多次亚克隆的方法建立了4株稳定分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株.腹水诱生法获得大量McAb,采用抗体亚类测定试剂盒鉴定抗体的亚类,SDS-PAGE测定抗体分子量,McAb的特异性和灵敏度用间接竞争抑制ELISA.结果 免疫小鼠血清检测结果显示经过5次免疫后血清的效价稳定在1×10-6,经过4次亚克隆后建立4株稳定分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株,获得腹水,纯化抗体,抗体亚类属于IgG2a类,轻链为κ轻链和重链的相对分子质量分别是55 000和32 000,ELISA检测抗体特异性显示可与FB1发生特异性反应,采用此抗体建立间接竞争抑制ELISA方法的线性范围在2～500 ng/ml.结论 制备了特异性和灵敏度较高的抗FB1单克隆抗体,为建立伏马菌素免疫学检测方法打下良好基础.

关键词：伏马菌素B1、杂交瘤细胞株、单克隆抗体

所属期刊栏目：12

分类号：R446.69(诊断学)

资助基金：广州市科技计划项目11C13150712;广州市医药卫生科技项目20121A021018

在线出版日期：2012-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1062-1064,1079