抗广州管圆线虫噬菌体抗体库的构建及初步筛选

摘要：

目的 以广州管圆线虫感染的小鼠脾细胞为源,构建抗广州管圆线虫抗体库,并筛选可用于广州管圆线虫病早期诊断的目的抗体.方法 提取感染广州管圆线虫的小鼠脾细胞RNA,并逆转录合成cDNA第一链,PCR扩增出抗体轻链和重链基因,将轻、重链基因先后连接到表达载体pComb3上,转化大肠杆菌XLI-Blue,构建组合文库.用广州管圆线虫排泄分泌抗原(EsAg)作为筛选抗原,进行富集筛选,用ELISA法鉴定阳性克隆.结果 成功构建了小鼠抗广州管圆线虫噬菌体抗体文库,库容为2.32×106,滴度为1.7×1013cfu/ml.筛选到了抗广州管圆线虫排泄分泌抗原特异性抗体克隆5株,用过氧化物酶标记的抗M13抗体进行初步鉴定,具有一定的特异性.结论 构建的抗广州管圆线虫噬菌体抗体库达到了要求,为研制广州管圆线虫金标诊断试剂盒奠定了基础.

关键词：噬菌体抗体库、Fab抗体、广州管圆线虫

所属期刊栏目：12

分类号：R383.1(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金与广东省人民政府联合基金U0632003

在线出版日期：2012-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1049-1052