呼吸道合胞病毒NS1基因原核表达及其免疫原性分析
目的:原核表达呼吸道合胞病毒(RSV)非结构NS1蛋白,并对其免疫特性进行研究.方法 采用PCR技术获得NS1基因,将其插入pET41a(+)载体上,导人大肠杆菌后诱导表达;利用GST亲和层析柱对诱导表达的NS1蛋白进行纯化,免疫动物制备抗体,Western blot法鉴定抗体的特异性.结果 重组质粒经酶切鉴定和DNA序列测序完全正确,经IPTG诱导后融合蛋白在大肠杆菌BL21-DE3中得到高效表达,表达产物经超声破碎和GST亲和层析纯化获得重组蛋白,分子量约42 000 Mr,以抗NS1蛋白的多克隆抗体为一抗进行Western blot检测,结果只有RSV感染细胞的样品在15 000 Mr处有特异性带显示,其他病毒感染的细胞和阴性对照没有相应条带.结论 NS1基因得到高效表达,免疫制备得到的抗体与RSV感染细胞有特异性反应,与其他常见呼吸道病毒感染细胞无交叉免疫反应.
呼吸道合胞病毒、非结构蛋白、蛋白纯化
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R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家“十二五”支撑课题2012BA105B00;澳门科学技术发展基金039/2009/A;广州市科技支撑计划项目2010J-E401;201143-00039;广州市医药卫生科技项目2008-YB-146
2012-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
926-929
