携带Oct4、Klf4、Sox2、c-myc和EGFP基因小鼠肿瘤细胞株的建立
目的 构建稳定携带Oct4、Klf4、Sox2、c-myc(以下简称为OKSM)和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的小鼠肿瘤细胞株.方法 将载体pLentG-KOSM用Not Ⅰ、Xba Ⅰ线性化,并进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),以鉴定其结构.按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒包装和确认慢病毒是否成功生产;携带OKSM和EGFP基因的慢病毒感染小鼠肝癌细胞(Hep1-6)、小鼠乳腺癌细胞(4T1)和小鼠肺癌细胞(LLC),以建立相应病毒感染体系.结果 pLentG-KOSM确实含有OKSM 4种基因,按标准程序生产的携带OKSM和EGFP基因的慢病毒上清高效率感染Hep1-6、4T1及LLC,成功建立稳定携带OKSM和EGFP基因的小鼠肿瘤细胞株.结论 成功构建携带OKSM和EGFP基因的Hep1-6、4T1、LLC细胞株,为相关的后续研究打下了良好基础.
Oct4、Klf4、Sox2、c-myc、肿瘤细胞重编程
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R34(人体生物化学、分子生物学)
国家自然科学基金委员会-广东省联合基金重点项目u0732006;国家自然科学基金30271177;广东省自然科学基金021903和9151063101000015;广东省卫生厅基金A2007359;南方医科大学优秀中青年科技人才库科研资助金;广州地区科学仪器协作共用网专用基金2006176
2012-09-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
366-368,封2