锁核酸结合分子信标技术检测乙型肝炎病毒DNA G1896A点突变研究

摘要：

目的 研究和评估乙型肝炎病毒(HBV)DNA G1896A点突变的实时荧光PCR检测方法.方法 收集经测序验证HBV DNA G1896A未突变的野生型样本150例和已发生突变的突变型样本58例,在突变区域设计分子信标探针,点突变处进行锁核酸处理,利用荧光PCR方法检测HBV前C区G1896A点突变；再从临床标本中随机抽取18例、8例和19例荧光PCR结果分别显示为G1896A突变的标本、杂合的标本以及野生型的标本的PCR产物进行序列测定.结果 突变型质粒和野生型质粒的检测灵敏度均可以达到100 copies/ml；突变型探针检测高浓度的野生型质粒时无检测信号,野生型探针检测高浓度突变型质粒时无检测信号；突变型模板在总杂合模板中的比例达到5％时则都可以将突变型检测出来；序列测定的8例G1896A突变标本、6例杂合标本和19例野生型标本的PCR产物结果和荧光PCR检测结果完全吻合.结论 实时荧光PCR检测方法可以快速、简便、准确地检测HBV DNA G1896A点突变,是检测点突变的重要方法,具有重要的临床应用价值.

关键词：乙型肝炎病毒、变异、分子信标、锁核酸、实时荧光PCR

所属期刊栏目：12

分类号：R512.62(传染病)

在线出版日期：2012-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：162-164,183