环介导等温扩增技术检测间日疟原虫方法的建立及应用分析
目的 建立一种快速、简便的检测间日疟原虫的环介导等温扩增方法(LAMP)并与常规PCR方法作比较.方法 根据间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因序列合成2对特异性LAMP引物,优化Mg2+浓度、dNTPs浓度、Bst DNA聚合酶添加量、反应温度、时间以及设计引物缺省试验.评估优化后的LAMP反应的特异性和灵敏性.检测133份患者血样,以显微镜检方法为金标准,比较LAMP和多重PCR法检测间日疟原虫的敏感性和特异性.结果 LAMP法检测重组质粒DNA(Pv-rDNA)的灵敏度达到10-10,为传统PCR方法的100倍.镜检确诊的68例间日疟、43例恶性疟和22例非疟疾患者中,LAMP法和多重PCR检测间日疟原虫的敏感性为98.53％和97.06％,两法基本相当(x2=0.34,P＞0.05)；特异性为86.15％和100％,LAMP法低于多重PCR法,差异有统计学意义(x2=9.67,P＜0.05).LAMP法的阳性预测值和阴性预测值分别为88.16％和98.25％,多重PCR的阳性预测值和阴性预测值分别为100％和97.01％.结论 LAMP法检测间日疟原虫具有快速简便、敏感性高、设备要求低的特点,具有较好的应用前景.
环介导等温扩增技术、间日疟原虫、基因检测
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R382.31(医学寄生虫学)
2012-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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