蓝氏贾第鞭毛虫中国株组蛋白H2A基因的克隆与重组表达
目的 获取蓝氏贾第鞭毛虫中国株GlH2A基因及重组蛋白.方法 PCR扩增获取G1H2A基因,连接至pMD-19T并进行测序分析.连接至pET28a构建表达载体,并转化宿主菌E.coli BL21 (DE3),然后进行异丙基硫代半乳糖苷酶(IPTG)诱导表达.表达产物进行亲和层析纯化,再用Western blotting进行免疫学鉴定.结果 序列测定获得蓝氏贾第鞭毛虫中国株GlH2A基因的编码序列,与美国WB株H2A (GL50803_14256,Accession:NW_001844132)序列完全一致.该基因编码124个氨基酸,预测分子量13 900 Mr,保留了与核小体形成相关的重要氨基酸位点,在大肠埃希菌中获得表达,纯化后纯度达90％以上.Western blotting检测表明重组蛋白能够被抗His6标签抗体识别.结论 克隆得到GlH2A基因编码序列;得到了重组GlH2A蛋白,并进行了纯化,为进一步研究组蛋白及其修饰酶在基因转录调控中的作用奠定了基础.
蓝氏贾第鞭毛虫、组蛋白H2A、克隆、表达
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R382.2(医学寄生虫学)
2012-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1107-1110,1137
