登革病毒3型病毒样颗粒在酵母体内的表达与鉴定

摘要：

目的 探讨登革病毒3型病毒样颗粒(DENV3-vLPs)的免疫原性.方法 用PCR法扩增登革病毒3型prME 基因,插入载体pGAPZaA构建重组质粒pGAPZaA-prME-D3,将其转化毕赤酵母X33构建转化子pGAPZaA-prME-D3/X33.对转化子表达上清和细胞裂解液进行SDS-PAGE和Western blotting分析.用蔗糖密度梯度离心纯化表达的DENV3-VLPs并进行鉴定和电镜观察.结果 成功构建重组载体pGAPZaA-prME-D3,获得酵母转化子pGAPZaA-prME-D3/X33,并应用毕赤酵母表达了DENV3-VLPs,表达蛋白约50 000 Mr,电镜观察vLPs直径为20～50 am.结论 应用酵母表达系统成功表达了DENV-3 VLPs,经鉴定表明其具有免疫反应性,为后续免疫原性研究及四价登革vLPs疫苗的构建奠定了基础.

关键词：登革病毒、病毒样颗粒、蔗糖密度梯度离心、毕赤酵母

所属期刊栏目：11

分类号：R373.33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金U063 2002

在线出版日期：2011-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：613-616,656