运用降落PCR同时快速检测NV、EV71和CoxA16病毒
目的 运用降落聚合酶链反应(touchdown PCR,TD-PCR)技术快速从腹泻、手足口病人粪便标本中同时检测诺如病毒(Norovius,NV)、肠道病毒71型(Enterovims 71 EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsaehie vims,CoxAl6),并评价该技术用于检测这3种病毒的效能和敏感性.方法 根据touchdown PCR原理设计TD-PCR程序,试验选择最佳反应条件.与普通PCR扩增效果进行评价.用10倍稀释检验TD-PCR方法的灵敏度,并用轮状病毒、札幌病毒、星状病毒、伤寒杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、香港海鸥形菌检测该方法的特异性.结果 TD-PCR能在一个反应条件下同时检测NV、EV71和CoxA16,扩增片段条带清晰,检测效果明显优于普通PCR,测序证实了3组片段的特异性,3种病毒cDNA的最低检测浓度分别为4.775μg/ml、2.360 μg/ml、43.273μg/ml.检测该方法特异性时,其他病原体未见特异性条带扩增.结论 成功建立的TD-PCR方法可同时检测腹泻和手足口病人粪便中NV、EV71和CoxAl6 3种病毒,为快速检测相关病原体、科学防治腹泻和手足口病疫情暴发提供了可靠手段.
降落聚合酶链反应、诺如病毒、肠道病毒71型、柯萨奇病毒A组16型、快速检测
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R446.61(诊断学)
2011-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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