弓形虫RH株微线体蛋白MIC3基因的克隆与表达
目的 克隆和表达弓形虫微线体蛋白MIC3基因.方法 从弓形虫RH株分离总的RNA,反转成cDNA.根据MIC3基因序列,设计合成一对引物,用聚合酶链式反应(PCR)方法从弓形虫cDNA中扩增MIC3基因片段,插人pGEM-T载体,并转化大肠杆菌Top10,经PCR、双酶切、测序验证后,将MIC3基因片段定向亚克隆到载体pET-28a中构建原核表达重组质粒pET-28a-MIC3,重组子在E.coli BL21中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western.blot分析.结果 从弓形虫RH株cDNA中扩增出792bp大小的MIC3基因片段并诱导表达27 300 Mr的重组MIC3蛋白.结论 成功构建和表达了弓形虫pET-28a-MIC3重组质粒,为弓形虫病诊断抗原和疫苗的研究莫定了基础.
弓形虫、MIC3、PCR、基因克隆、原核表达
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R382.5(医学寄生虫学)
2011-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1153-1155,1172
