4株蚊媒病毒多重RT-PCR快速检测方法的建立

摘要：

目的 建立登革1、2型病毒、黄热病毒及流行性乙型脑炎病毒的多重RT-PCR快速检测方法.方法 参照病毒核酸序列设计多重RT-PCR引物,并检索GenBank国际基因序列数据库初步验证其特异性,随后对Mg2+,dNTP及引物浓度,RT-PCR反应条件进行优化,建立稳定、特异的多重RT-PCR快速检测4株病毒方法,并以同属于黄病毒科的登革3型病毒、登革4型病毒及甲病毒属基孔肯亚病毒、辛德毕斯病毒为对照,验证其特异性.结果 应用多重RT-PCR反应体系,对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果;采用多重RT-PCR引物对登革1、2型病毒、黄热病毒及流行性乙型脑炎病毒进行扩增,分别获得574、251、879、422 bp片段,与设计相符,而对照病毒组均无非特异性扩增条带.结论 实验证明,所建立的多重RT-PCR方法能够快速地检测登革1、2型病毒、黄热病毒及流行性乙型脑炎病毒,为其检测提供了一种方便易行的方法.

关键词：登革病毒、黄热病毒、流行性乙型脑炎病毒、多重RT-PCR

所属期刊栏目：10

分类号：R373.33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广东省科技计划项目20006B36008005

在线出版日期：2010-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：918-920