慢病毒介导的重组p27kip1对肾癌恶性表型影响
目的 观察LV/p27kip1慢病毒颗粒感染对肾癌细胞株786-0恶性表型影响及裸鼠皮下移植肿瘤的影响,以明确p27kip1在肾癌中的生物学特性,期望为肾癌的预后评估及基因治疗策略提供实验依据.方法 利用四质粒系统包装并纯化LV/p27kip1慢病毒颗粒,对786-0细胞进行感染后分别进行Western Blot检测、细胞周期分析、细胞增殖测定、细胞杀伤率测定.选取BALB/C裸鼠,构建皮下移植瘤成功后注射LV/p27kip1慢病毒,结束治疗后进行组织病理学检查及TUNEL检测.结果 通过外源基因的导入,Western Blot显示p27kip1蛋白在感染后的786-0细胞中高表达,且跟随MOI值的增高而表达量相应增多;细胞周期分析表明外源性p27kip1蛋白在786-0细胞高表达可抑制细胞由G1期向S期过渡:细胞增殖曲线提示感染后第72小时起细胞出现显著的数量下降,且随着MOI值的增加提高对细胞增殖的抑制;细胞杀伤性检测表明MOI=2、MOI=4、MOI=8组的LV/p27kip1感染对细胞有显著杀伤作用,但影响效果无明确的规律;体内实验证实裸鼠皮下肿瘤在病毒的作用下出现了明显的坏死及凋亡.结论 增加外源性p27kip1表达可以阻滞肾癌细胞周期,抑制肿瘤细胞增殖,诱发凋亡.
p27kip1、肾细胞癌、慢病毒
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R737.11(肿瘤学)
2010-10-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
799-802,封3