家蚕蚕蛹过敏原几丁质酶基因的克隆和原核表达载体的构建

摘要：

目的 克隆、表达家蚕蚕蛹过敏原几丁质酶基因,并构建其原核表达载体.方法 提取家蚕的总RNA,RT-PCR克隆家蚕过敏原几丁质酶的全长基因,设计简并引物,扩增家蚕几丁质酶基因的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接,构建原核表达载体.结果 成功克隆家蚕主要变应原几丁质酶基因并构建其原核表达载体.该基因含有长度为1 668 bp的开放阅读框,编码555个氨基酸.该蛋白质的相对分子质量为61 500,电点为5.78,编码序列与数据库中已知的家蚕几丁质酶基因的同源性为99%.结论 成功克隆家蚕蚕蛹主要过敏原几丁质酶基因并构建了原核表达载体,为家蚕蚕蛹过敏原几丁质酶的重组表达和免疫活性鉴定等奠定了基础.

关键词：家蚕、过敏原、几丁质酶、基因克隆、原核表达载体

所属期刊栏目：10

分类号：R384.9(医学寄生虫学)

资助基金：国家973计划项目2005CB121000;深港创新圈项目200701

在线出版日期：2010-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：520-523