人脂联素球状结构域基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达
目的 利用杆状病毒表达系统表达人脂联素球状结构域(gAd)基因.方法 以人基因组为模板,PCR法扩增人gAd基因,将gAd基因与供体质粒pFastBacHTB连接,转化含有穿梭载体:Bacmid的大肠杆菌DH10Bac.筛选转座成功的重组穿梭载体Bacmid-gAd,通过脂质体介导,转染昆虫细胞Sf9,经SDS-PAGE、免疫印迹法检测表达产物.结果 重组杆状病毒感染的Sf9细胞形态变化明显,SDS-PAGE电泳结果 显示,Bacmid-gAd组和对照组相比,在相对分子质量15 000~25 000之间多出一清晰的蛋白条带,免疫印迹法证实该条带能与相应的抗His标签抗体结合.结论 人gAd基因成功在真核细胞中表达,为后续的实验研究奠定了基础.
脂联素球状结构域、杆状病毒、昆虫细胞 Sf9
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Q78(基因工程(遗传工程))
第八轮广东省高等学校重点扶持学科资助项目粤教科200726号
2010-07-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
372-376,封2