人源脂肪细胞SH2B1β基因的克隆表达
目的 获取人源脂肪细胞SH2B1β基因序列,构建SH2B1β-pET28a(+)重组表达质粒,在大肠杆菌中对其进行表达.方法 利用RT-PCR方法 从人源分化成熟的脂肪细胞RNA中扩增出SH2B1β的cDNA片段,并插入pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导表达带6xHis标签的融合蛋白.结果 PCR和酶切电泳鉴定结果 显示SH2B1β基因克隆人载体中,测序结果 证实克隆的基因序列与GenBank中的人源SH2B1β序列相符,SDS-PAGE电泳结果 表明获得相对分子质量约75 000的目的蛋白.结论 成功获取了人源脂肪细胞的SH2B1β基因,并在BL21(DE3)中高效表达目的蛋白,为下一步表达纯化SH2B1β重组蛋白及蛋白的初步功能研究奠定基础.
SH2B1β、克隆、原核表达
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R392.11
2009-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
249-252
