FSHR部分基因的真核表达质粒构建和生物信息学分析
目的 克隆FSHR基因部分片段(145~330 bp)(FSHRn),构建真核表达重组质粒,预测其编码蛋白作为候选避孕疫苗的可行性.方法 提取小鼠睾丸组织的总RNA,利用RT-PCR技术反转录成cDNA,按照GenBank中小鼠FSHR N-端序列设计引物,扩增基因片段并插入pcDNA3.1/myc-His(-)B载体,重组质粒经PCR、双酶切和测序鉴定后用Vector NT19.0软件作生物信息学分析.结果 扩增片段长度为186 bp,测序结果 与已知序列吻合,重组真核表达质粒经PCR和双酶切鉴定获得正确重组子.生物信息学分析其编码蛋白抗原性肽段主要集中在15~20aa、22~27aa、32~36aa、42~48aa、58~67aa,与人的基因同源性为90%.结论 成功克隆了FSHRn基因片段并构建了pcDNA3.1/FHSRn真核表达重组质粒;FSHRn具有良好的抗原性,FSHRn蛋白可作为良好的动物候选疫苗,为此段蛋白的深入研究和人类男性避孕疫苗的研制打下基础.
FSHR、疫苗、真核表达、生物信息学
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R34(人体生物化学、分子生物学)
广东省重点实验室建设基金2004B60144
2009-05-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
238-240,252