O139群霍乱弧菌TLC、CTX、RTX基因簇缺失株的构建及鉴定

摘要：

目的 构建O139群霍乱弧菌TLC、CTX、RTX基冈簇缺失株.方法 PCR扩增TLC上游片段(TLC up)、RTX下游片段(RTX down),克隆入pu18中,再在两者间插入氯霉素抗性(Cm)基因,获得重组质粒pUC18-TLC up-Cm-RTX down.酶切回收TLC up-Cm-RTX down片段,克隆入自杀质粒pDS132,构建重组自杀质粒pDS132-TLC up-Cm-RTX down.通过接合将重组自杀质粒转入O139群霍乱弧菌ZJ199693,20%蔗糖选择培养基(Cm抗性)筛选TLC、CTX、RTX基凶缺失株.结果 PCR、酶切证明重组自杀质粒pDS132-TLC up-Cm-RTXdown构建正确.PCR证实0139群霍乱弧菌ZJ199693 TLC、CTX、RTX毒力基因簇成功缺失.结论 成功缺失O139群霍乱弧菌ZJ199693TLC、CTX、RTX基因簇,为进一步研究其功能和疫苗构建打下基础.

关键词：霍乱弧菌、毒力基因、同源重组

所属期刊栏目：9

分类号：R378.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30470099

在线出版日期：2009-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：125-127,150