人脐血内皮祖细胞的分离、培养及鉴定
目的 探索人脐静脉血内皮祖细胞的分离培养,为内皮祖细胞的临床应用提供实验方法.方法 选择脐静脉血,应用密度梯度离心法,获取单个核细胞,接种于预先包埋了人纤维连接蛋白的培养板.用加入生长因子VEGF165和bFGF的内皮细胞专用培养基EGM-2MV培养细胞,3 d后,洗掉非贴壁细胞,换培养液继续培养至7 d,收集贴壁细胞进行细胞分析.激光共聚焦显微镜进行细胞功能学鉴定,流式细胞术测定祖细胞和内皮细胞系标志,MTT比色法检测细胞的生长状态.结果 经过梯度密度离心和贴壁法选择的细胞能特异性吸附FITC标记的荆豆凝集素并内吞Dil-acLDL,祖细胞标志CD133及内皮细胞特异性抗原CD34、KDR检测.其阳性率分别为(27.05±2.94)%、(16.37±2.69)%和(56.67±7.29)%;体外培养的内皮祖细胞具有良好的细胞增殖活性.结论 人脐静脉血中可以分离培养内皮祖细胞,为内皮祖细胞的进一步研究及临床应用奠定了基础.
脐血、内皮祖细胞、单个核细胞
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R446.11(诊断学)
广东省自然科学基金07300312;8451051501000580
2009-03-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
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