CTX-M型阴沟肠杆菌的基因克隆及原核表达产物特性研究

摘要：

目的 对阴沟肠杆菌所产CTX-M型β-内酰胺酶进行基因克隆、原核表达重组质粒的构建及其特性研究.方法 以产CTX-M型β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌45号基因组DNA为模板,设计两对引物PCR扩增CTX-M,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列.再将CTX-M基因克隆到pGEX-6P-3表达质粒并转入感受态BL21,选择阳性菌落进行药物敏感试验和酶动力学检测.结果 PCR扩增出大小为876 bp和1 067 bp的基因片段,与GenBank上CTX-M-9和CTX-M-3酶的基因序列同源性为100%.CTX-M-3型重组菌株药敏试验结果 与原菌株相比,对青霉素类和头孢噻肟具有明显的水解作用,第三、四代头孢菌素对之较为稳定,动力学结果与酶稳定性结果基本一致.结论 重组质粒pGEX-6P-3/CTX-M构建成功,CTX-M-3型重组菌株与原菌株比较,对β-内酰胺类抗生素的敏感性和稳定性增加,亲和力下降.

关键词：CTX-M型、克隆、重组质粒、酶动力学

所属期刊栏目：8

分类号：R378.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广东省自然科学基金5002318;广东省科技厅项目No.63077:广州市科技局2007J1-C0141;广州市医药卫生科技2007-YB-156

在线出版日期：2009-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1004-1008,1027