三羟异黄酮上调p53信号通路诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

摘要：

目的 探讨三羟异黄酮(genistein)诱导肝癌细胞凋亡过程中p53信号通路的调控机制.方法 MTT法检测Genistein对肝癌HepG2细胞的杀伤作用,流式细胞仪检测Genistein诱导的细胞周期变化和凋亡率,应用荧光底物法检测Caspase-3活性,Western blotting分析细胞p53蛋白、p21和Bax蛋白表达.结果 MTT法检测表明.随着药物剂量的增加和作用时间延长,Genistein对HepG2的杀伤效果亦增加;细胞周期研究表明,Genistein能够阻滞细胞周期于G2/M期,随着药物处理浓度的增加,HepG2细胞处于C2/M期细胞的比例由对照组的(22.9±1.6)%增加到80 μmol/L处理组的(63.8±2.4)%,各处理组G2/M期比例和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);凋亡研究和Caspase-3活性分析表明,Genistein能够显著诱导HepG2细胞凋亡,且具有作用时间依赖效应.随着药物作用时间延长,HepG2凋亡细胞比例由对照组的(1.6±0.5)%增加到72 h处理组的(30.7±5.6)%,各处理时点凋亡细胞比例和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).Caspase-3活性检测结果表明,Caspase-3相对活性随药物处理浓度增加而出现显著上调,由对照组的(100±2.5)%增加到80 μmol/L处理组的(225.1±21.2)%.各处理组Caspase-3相对活性和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);Western Blotting检测表明,随着Genistein作用时间的延长,磷酸化p53水平上升,且p21和Bax水平上调.结论 Genistein能通过抑制磷酸肌醇信号通路,上调磷酸化p53蛋白水平.激活其下游信号通路分子如p21和Bax的表达,从而阻滞细胞周期于G2/M期,并通过活化Caspase-3诱导肝癌细胞凋亡.

关键词：肝癌、三羟异黄酮、p53、细胞周期、细胞凋亡

所属期刊栏目：8

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：深圳市科技基金200304095

在线出版日期：2008-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：893-896,910