人巨细胞病毒部分抗原基因的克隆及表达

摘要：

目的 克隆表达人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)特异性强的抗原决定簇基因,制备特异性抗原.方法 从感染HCMV的细胞上清液中提取病毒基因组DNA,用PCR扩增HCMVpp150(ppUL32)、gp52(UL44)、pp65(ppUL83)、ppUL80a蛋白IgM抗原决定簇编码区DNA序列,将其克隆至pMD-18T载体并测序,然后克隆至表达载体pGEX-4T-1诱导表达,采用免疫印迹法(Western blotting)检测表达产物的抗原性.结果 经序列测定各基因片段序列正确,并在pGEX-4T-1表达载体中得到了高效表达,表达的融合蛋白经Westernblotting和ELISA分析,具有良好的抗原性,能够与HCMV IgM阳性血清发生特异性反应.结论 通过基因工程技术可以有效地获取纯度较高、特异性强的HCMV抗原,为HCMV感染者的早期诊断提供检测用抗原.

关键词：人巨细胞病毒、IgM、PCR、克隆与表达

所属期刊栏目：7

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2007-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：218-221