SARS冠状病毒M基因膜内区的克隆、表达与鉴定

摘要：

目的 对SARS冠状病毒M蛋白膜内部分(Mc蛋白)的基因(Mc区)进行克隆、表达及鉴定.方法 采用PCR技术从SARS-CoV GD322株M基因全长片段上扩增得到Mc区,克隆至pGEM-T载体.利用引物上的EcoRⅠ/XhoⅠ酶切位点切下Mc区插入至pET-32a(+)表达载体,转化原核表达系统BL21,表达His-融合蛋白,利用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行鉴定.结果 扩增的Mc区长度为360 bp,重组子经PCR,双酶切和测序鉴定,获得pET-32a(+)/Mc原核表达菌株并可进行高效表达,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot验证为相对分子质量约43 000的融合蛋白,与预期理论值相符.结论 实现了Mc蛋白的高效表达,为进一步研究SARS冠状病毒Mc蛋白的生物学作用奠定了基础.

关键词：SARS冠状病毒、Mc蛋白、Mc区、表达、鉴定

所属期刊栏目：7

分类号：R373.36(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广东省医药卫生科研项目A2004378

在线出版日期：2007-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：215-217