福氏志贺菌毒力蛋白IpaC的表达、纯化及免疫活性鉴定

摘要：

目的 表达、纯化福氏志贺菌毒力蛋白IpaC并对其免疫活性进行鉴定.方法 将含有ipaC基因的pET32a-ipaC表达质粒载体转入大肠杆菌BL21(λDE3)中表达,表达产物进行SDS-PAGE鉴定,并采用QIA expressionist(TM)蛋白纯化系统纯化IpaC蛋白;用纯化的蛋白免疫动物获得抗血清,Western-blot检测抗原的免疫活性.结果 诱导后的表达产物经SDS-PAGE发现有一相对分子量红为63000的条带,其含量约占总蛋白量的11%.对融合蛋白进行纯化纯度可达90%以上,抗His的抗体Westem-blot分析,发现特异性区带出现在63000u处.证明该蛋白是所要表达的融合蛋白,制备的免疫血清可与IpaC发生特异免疫反应.结论 pET32a-ipaC重组表达质粒转入大肠杆菌后,可稳定、高效地表达毒力蛋白IpaC,且纯化后的蛋白具有免疫活性.

关键词：福氏志贺菌、毒力蛋白(IpaC)、原核表达、蛋白纯化、免疫活性

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分类号：R378.25(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：解放军医药卫生科研项目01L050

在线出版日期：2007-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：126-128,132