重组日本血吸虫乳酸脱氢酶(SjLDH)酶学特性的研究

摘要：

目的 获得重组SjLDH主要的酶动力学参数.方法 分光光度计测定NADH在340 nm处吸光度的变化,检测不同pH及温度下重组蛋白催化正、逆反应的效率以确定其最佳pH、最佳温度;分别固定底物NADH、丙酮酸、NAD+及乳酸浓度,分别测定丙酮酸、NADH、乳酸及NAD+在不同浓度下的反应速度,计算机Lineweaver-Burk双倒数方程回归计算各底物的米氏常数(Km值)、最大反应速度(Vmax),并比较各自的Vmax/Km值.结果 重组蛋白酶活性为379 U/mg.催化正、逆反应的最佳pH分别为pH 6.0～7.0和pH 9.0～10.O;催化正、逆反应的最佳温度分别为37～60℃及40～50℃,后者在70℃时仍有较高催化活性;在NADH辅酶作用下,重组sjLDH催化丙酮酸还原为乳酸的最大反应速度是催化NAD+作用下乳酸氧化为丙酮酸的21倍.比较丙酮酸与乳酸的Vmax/Km值,前者是后者的23倍,而NADH的Vmax/Km值是NAD+的7倍.结论 重组蛋白在生理条件下主要催化丙酮酸还原为乳酸的反应.

关键词：日本血吸虫、乳酸脱氢酶、酶、特性

所属期刊栏目：7

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

在线出版日期：2007-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：122-125