日本血吸虫尾蚴cDNA文库的免疫学筛选及EST序列的分析

摘要：

目的 为获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)转化生长因子β1(TGF-β1)基因的部分或全长cDNA序列,同时验证用针对某一蛋白的抗体筛选表达文库是否可以得到相应蛋白对应的基因序列.方法 采用兔抗鼠TGF-β1血清,对Si尾蚴cDNA表达文库进行免疫学筛选,对阳性克隆进行PCR扩增后,将大于500 bp的克隆进行复筛,对复筛阳性的克隆进行测序和生物信息学鉴定.结果 对大约106个噬菌斑进行了初筛,共获得7个阳性克隆;经过PCR扩增后,其中有4个克隆大于500 bp,复筛获得3个持续阳性克隆;对测序后的阳性克隆进行生物信息学鉴定,得到的三个克隆均与日本血吸虫辅酶Q10氧化还原酶(SjCHGC)基因具有高的同源性(Blastn分值都大于200).结论 SjCHGC蛋白与兔抗鼠TGF-β1抗体的反应为交叉反应,用抗某一蛋白的抗体筛选表达文库得到相应蛋白的基因序列的方法不一定可行.

关键词：日本血吸虫、免疫学筛选、TGF-β

所属期刊栏目：7

分类号：R383.24(医学寄生虫学)

资助基金：广东省自然科学基金5300973

在线出版日期：2007-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：46-48,54