阴道毛滴虫Rab1a重组蛋白的表达和细胞内定位

摘要：

目的 制备阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis,Tv)Rab1a重组蛋白及其多克隆抗体,并对TvRab1a蛋白进行阴道毛滴虫的细胞内定位.方法 将我们已构建的pQE80L/TvRab1a重组表达质粒转入大肠埃希菌E.coli M15,在IPTG诱导下表达重组蛋白,经Ni-NTA亲和柱层析后获得纯度较高的TvRab1a的重组蛋白;用经复性处理的重组蛋白免疫动物,获得TvRab1a重组蛋白抗血清,免疫印迹Western Blot鉴定抗血清.采用荧光免疫细胞化学对TvRab1a蛋白进行细胞内定位.结果 Western Blot分析显示,TvRab1a重组蛋白可与豚鼠的抗TvRab1a血清反应,同时该抗血清在滴虫提取蛋白中检测到与预测TvRab1a分子量一致的条带;免疫荧光化学检测发现TvRab1a分布于细胞核周围的高尔基复合体与内质网.结论 获得的抗TvRab1a蛋白的多抗血清可用于TvRab1a基因功能的研究;TvRab1a功能场所位于高尔基复合体与内质网.

关键词：阴道毛滴虫、Rab1a、重组蛋白表达、TvRab1a抗血清、细胞内定位

所属期刊栏目：6

分类号：R382.21(医学寄生虫学)

在线出版日期：2007-01-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1253-1256