淋球菌主要外膜蛋白PIA原核重组质粒的构建及序列分析

摘要：

目的构建携带淋球菌主要外膜蛋白 PIA基因的 pET重组质粒,分析其编码序列.方法根据 PIA已知序列设计一对引物,用 PCR技术从淋球菌捷克标准株中扩增 PIA;将目的基因 PCR产物和质粒 pET28a(+)同时用 BamH Ⅰ和 Hind Ⅲ限制性内切酶进行双酶切,纯化回收后将其连接并将重组质粒转化大肠杆菌 DH5α.将构建的重组质粒 pET28 a(+)-PIA通过 PCR、质粒双酶切、 DNA测序证实获得正确的重组克隆.结果成功构建 PIA基因原核重组质粒 pET28a(+)-PIA.序列分析表明,其携带的 PIA基因序列与 GenBank中公布的淋球菌( AF090818)的 PIA序列具有很高的同源性,其同源性达到 99.9%. 结论成功构建携带淋球菌主要外膜蛋白 PIA基因重组表达载体,有助于更深入地分析其基因功能,为后期淋球菌的临床检测和基因疫苗研制打下基础.

关键词：淋球菌、主要外膜蛋白 PIA、重组质粒

所属期刊栏目：4

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：湖北省卫生厅科研项目JX1B037

在线出版日期：2004-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：524-527