10.3969/j.issn.1672-3619.2002.04.007
EBV-LMP1 cDNA的克隆测序与原核表达质粒构建
目的克隆EBV-LMP1 cDNA,构建EBV-LMP1基因的原核表达重组质粒.方法通过RT-PCR技术从B95-8细胞中扩增EBV-LMP1 cDNA,克隆至pGEM-T easy载体上并测序;利用引物上的BamHⅠ与HindⅢ酶切位点将LMP1基因插入载体pET-32a,转化JM109菌.提取质粒,限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳鉴定.结果扩增的LMP1 cDNA长度为1158bp,测序结果与已知序列吻合,重组原核表达质粒经酶切鉴定表明获得正确重组子.结论成功克隆了EBV-LMP1 cDNA,并构建了pET-32a-LMP1原核表达载体,为研究LMP1在EBV致瘤中的作用及肿瘤疫苗奠定了基础.
LMP1、cDNA、克隆、测序、原核表达
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R373.1+1(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金39970292;卫生部科研项目98-2-346;广东省自然科学基金990183
2004-02-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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