10.3969/j.issn.1672-3619.2002.01.008
美洲大蠊若虫变应原的基因克隆及序列测定
目的对美洲大蠊若虫cDNA表达文库进行免疫学筛选,分离和鉴定美洲大蠊若虫特异性重组变应原克隆,并测定其基因序列,从而为美洲大蠊若虫重组变应原疫苗候选基因的筛选提供科学依据.方法选用对美洲大蠊若虫过敏的变态反应疾病患者(如哮喘、过敏性鼻炎)阳性血清,对美洲大蠊若虫cDNA文库进行免疫学筛选.使用按照重组载体入ExCell NotI/EcoRI/CIP 臂插入位点邻近区域的上、下游碱基序列设计的引物,扩增阳性噬菌斑中插入的cDNA片段.并对cDNA插入片段进行序列测定.结果经用阳性血清对2.3×104噬菌体斑的免疫学筛选,获得了5个阳性克隆,PCR直接序列分析表明这5个阳性克隆均为美洲大蠊若虫变应原未知基因克隆.结论该研究发现了美洲大蠊若虫变应原新基因,为进一步开展美洲大蠊若虫特异性重组变应原的研究奠定了基础.
美洲大蠊若虫、重组变应原、cDNA文库、免疫学筛选、序列分析
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R392.8;Q523+8
国家自然科学基金39860071;卫生部科研项目;中国博士后科学基金
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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