两种DNA的PCR产物克隆入同一载体的构建策略

摘要：

目的以克隆小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛可变区首尾区域的双独立片段为例,探讨克隆入同一载体的基因数多于一个时可采取的构建策略.方法在一个基因A正义引物与另一基因B负义引物的5'端分别设计与克隆载体相匹配的酶切位点,在B基因正义引物与A基因负义引物的5'端设计相同的酶切位点.分别进行PCR扩增,再通过引物的5'端相同的酶切位点进行两PCR产物的酶切与连接,以连接产物为模板,应用A基因正义引物和B基因负义引物进行PCR扩增,将此次PCR产物经常规方法克隆入载体.

关键词：克隆、DNA重组、小肠结肠炎耶尔森菌、可变区

所属期刊栏目：1

分类号：R596.3(全身性疾病)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划G1999054101

在线出版日期：2005-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：133-135