澳洲坚果SCoT反应体系的建立及应用

摘要：

为建立澳洲坚果(Macadamia spp.)的SCoT 最适反应体系,用单因素设计方法对影响SCoT-PCR 反应体系的主要影响因素进行了优化筛选,并构建了澳洲坚果种质的指纹图谱.结果表明,澳洲坚果的SCoT 最适反应体系为:反应体系总体积为20 μL,包含2.5 mmol L-1 Mg2+,0.3 mmol L-1 dNTPs,0.8 μmol L-1 引物,40 mg L-1 模板DNA 和1.0 U Taq DNA 聚合酶.最适退火温度为50℃.该反应体系对澳洲坚果种质具有良好的稳定性、可靠性和较高的分辨率.选用多态性良好的单引物SC5 和引物组合SC34 + SC39,可以将12 份澳洲坚果种质完全区分开,每份种质都各有独特的指纹图谱,置信概率达到99.988%.构建的SCoT 反应体系可为澳洲坚果种质鉴定和遗传多样性分析等提供技术支持.

关键词：澳洲坚果、SCoT、单因素试验、体系优化、DNA指纹图谱

所属期刊栏目：21

分类号：S66;S60

资助基金：广西直属公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目桂热研201102

在线出版日期：2013-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：253-258