番茄SlmiR393基因超表达载体的构建及其靶基因鉴定

摘要：

为研究番茄(Lycopersicum esculentum)的SlmiR393基因功能,采用生物信息学方法从番茄基因组数据库中获得SlmiR393的前体序列及其潜在的靶基因.以基因组DNA为模板,克隆了番茄SlmiR393前体基因并整合到pLP35S-100植物表达载体；采用5'RACE RT-PCR技术验证SlmiR393对预测靶基因mRNA的剪切作用,采用定量PCR技术检测SlmiR393及其靶标基因在番茄不同组织的表达.结果表明,SlmiR393的前体序列含有完整的茎环结构；成熟miR393与3个生长素受体同源基因(SlTIR1、SlTIR1-like1和SlAFB)之间具有识别作用位点.SlmiR393可对番茄3个靶基因的转录本进行剪切降解；SlmiR393与3个不同靶基因(SlTIR1、SlTIRl-like和SlAFB)的表达模式在叶和茎、花蕾、花中存在一定的互补关系.因此,推断番茄中的SlmiR393可能在特定的组织或发育时期介导特定的靶基因mRNA的剪切降解,初步证实生长素受体同源基因为SlmiR393的靶基因.此外,成功构建以CaMV35S为启动子的植物表达载体pLP35 S-pre-SlmiR393,为深入研究SlmiR393在番茄生长素信号转导中的功能奠定了基础.

关键词：番茄、SlmiR393、生长素受体同源基因、载体构建

所属期刊栏目：21

分类号：R39;TE9

资助基金：教育部博士点基金项目20110191110029;国家自然科学基金项目30972002,31071798

在线出版日期：2013-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：133-140