农杆菌介导佛手遗传转化主要影响因素的研究

摘要：

采用根癌农杆菌介导的佛手叶盘转化法,在建立转海藻糖合酶基因(TPS)佛手体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行了研究.结果表明,佛手叶盘需在黑暗条件下MT培养基上预培养2-3 d,与农杆菌共培养3 d较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.6-0.8,感染时间20 min;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)250 mgL-1和羧苄青霉素(Cb)250 mgL-1且延迟筛选时间4 d最好;共培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮(AS)和400mg L-1半胱氨酸(L-Cys)对佛手遗传转化有明显的促进作用.经GUS报告基因和PCR技术检测,初步证实TPS基因已整合到佛手基因组中,且GUS报告基因瞬时表达率为5.9%.

关键词：佛手、农杆菌、遗传转化、海藻糖合酶基因(TPS)

所属期刊栏目：14

分类号：Q813(生物工程学(生物技术))

资助基金：浙江省科技计划2003C32043

在线出版日期：2006-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：374-381